洁净室（区）的检测

本文阐述了洁净室（区）的检测。对洁净室（区）级别参数尘粒最大允许数、微生物最大允数、换气次数、照度、压差、温度和相对湿度进行了实际检测方面的归纳和总结。

兽药GMP是指兽药生产质量管理规范，是兽药生产、质量管理的制度和基本准则。兽药GMP对于洁净室（区）的空调净化系统等硬件要求非常严格，洁净级别划分的规定亦十分明确。洁净室（区）的洁净级别主要用尘粒最大允许数、微生物最大允许数和换气次数3个参数来划分，同时对照度、压差、温度和相对湿度等参数也作出了具体的指导和规定。这些参数能对洁净室（区）的级别作出相应合理的、科学的验证和监测。下面主要阐述这些参数具体的检测。

一、  洁净室（区）尘粒

尘粒是指一般尺寸为0.001μm～1000μm的固态和液态物质或两者的混合物。尘粒检测主要采用仪器光散射法，即空气中的悬浮粒子在光的照射下产生光散射现象，散射光的强度与粒子的表面积成正比。检测时，先确认空调净化系统是否处于正常运行状态，换气次数或风速、压差能否达到要求。然后按人流和物流的规定进入洁净室（区）进行动态或静态检测，并测量洁净室（区）的面积和容积，确定采样点的数目、位置和采样量。检测要点见表1。

尘粒采样时还需注意：1.在确认仪器计数稳定后方可开始连续读数。2.采样管必须干净，严禁渗漏。3.采样管的长度应根据仪器的允许长度。除另有规定外，长度不得大于1.5m。4.计数器采样口和仪器工作位置应处在同一气压和温度下，以免产生测量误差。5.须按照仪器的检定周期，定期对仪器作检定，以保证测试数据的可靠性。6.对于单向流，仪器采样口的朝向应正对气流方向，对于非单向流，采样口宜向上。7.布置采样点时，应避开回风口。8.采样时，测试人员应在采样口下风侧。

二、  洁净室（区）微生物

洁净室（区）微生物可检测沉降菌或浮游菌。沉降菌检测是通过自然沉降原理，收集空气中的生物粒子于培养基平皿中，经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。浮游菌的检测是采用计数浓度法，即通过收集悬浮在空气中生物粒子于专门的培养基，经若干时间，在适宜的生长条件下其繁殖到可见的菌落进行计数，从而判定洁净环境内单位体积空气中的活微生物数，以此来评定洁净室（区）的洁净度。实际检测浮游菌和沉降菌时，先确认洁净室（区）的检测条件能否达到级别要求。达到要求后，测试人员和检测仪器等按洁净室（区）的进出规定（如穿戴符合环境级别的工作服、紫外照射、仪器外体消毒等）进出洁净室（区），测试人员先测量测试区域的面积和体积，确定采样次数和采样点。浮游菌确定采样量后按仪器操作规程操作，把空气中悬浮的微生物采集到肉汤琼脂培养基上。沉降菌确定采样时间后直接把培养基裸露在空气中，让空气中的微生物自动降落在肉汤琼脂培养基上。采样要点见表4～7。采集完的培养基需在30℃～35℃培养箱中培养，时间≥48h。同时选定不少于3只培养基作空白对照培养。

微生物检测时需注意：1.检测前应仔细检查每个培养皿的质量，不能使用有变质、破损或污染的培养基和培养皿。2.采取一切措施防止采样管的污染和其他人为对样本的污染。3.对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。4.由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落或培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。5.若在本实验室以外的环境中进行检测，则培养基在整个运输过程中必须对温度进行控制，培养基需放在含有冰块的、消毒过的运输箱内，温度控制在0℃～4℃，并在记录中记录运输温度。

三、洁净室（区）风速和换气次数

风速和换气次数检测依据为JGJ71-90。风速、换气次数必须首先进行检测，洁净室的各项效果必须是在设计的风速风量条件下获得的。以风口截面平均风速乘以风口净截面面积确定风量。洁净室（区）换气次数以送风量除以洁净室（区）的体积来确定，从而判定洁净室（区）是否符合级别规定，百级洁净室（区）只需以最低风速进行判定。检测要点见表10。检测时，需注意检测风速宜用检测架固定风速仪以避免人体干扰，不得不手持风速仪检测时，手臂应伸直至最长位置，使人体远离测头。

四、洁净室（区）压差、照度、噪声、温度和湿度

     这些参数指标主要以JGJ71-90为检测依据，以各检测仪的原理进行检测。检测要点见表11～14。

    检测需注意:1.噪声检测时，检测人员不得发出任何有碍于结果测定的声音（如摩擦声，说话声等）。2.照度检测时，仪器的采样探头不能有杂物污染，采样时应在明亮处，不能在物体的阴影处采样，且洁净室（区）照度只测定除特殊局部照明之外的一般照明。

 四、洁净室（区）压差、照度、噪声、温度和湿度

这些参数指标主要以JGJ71—90为检测依据，以各检测仪的原理进行检测。检测要点见表11~14。

检测需注意：1.噪声检测时，检验人员不得发出任何又碍于结果测定的声音（如摩擦声，说话声等）。2.照度检测时，仪器的采样探头不能有杂物污染，采样时应在照明亮处，不能在物体的阴影处采样，且洁净室（区）照度只测定除特殊局部照明之外的一般照明。